Subaru Hasegawa memiliki ambisi untuk menjadi salah satu superstar bola basket terbaik sepanjang masa. Namun, ini berhenti ketika tim basket sekolahnya menghentikan kegiatan selama setahun. Terkejut oleh berita itu, dia memutuskan untuk tidak melibatkan dirinya lagi dalam bola basket. Suatu hari, bibinya Mihoshi Takamura mengundangnya untuk melatih tim bola basket putri Keishin Academy tentang cara bermain olahraga, dan dia dengan enggan setuju. Dia bertemu dengan siswa kelas enam Tomoka Minato, Maho Misawa, Airi Kashii, Hinata Hakamada dan Saki Nagatsuki, dan mulai melatih mereka dalam olahraga dengan satu tujuan: untuk mengalahkan semua lawan yang kuat di sepanjang jalan.Ro-Kyu-Bu! mengikuti upaya lima anak perempuan dasar dan pelatih mereka saat mereka gaya lucu mereka bermain basket.